产品内容：

提取液：液体 75mL×1 瓶，4℃保存。

试剂一：粉剂×1 瓶，临用前加 25mL 提取液溶解。-20℃避光保存。

产品说明：

尿酸是鸟类和爬行类动物的主要代谢产物，正常人体尿液中产物主要为尿素，含少量尿酸。此 外，UA 还是重要的抗氧化剂，能清除超氧化物，羟自由基等。体内 UA 生成量和排泄量不平衡会 导致多种疾病的发生。例如，血中 UA 升高会引起痛风、肾功能损害和动脉硬化，相反 UA 降低会 引起恶性贫血，在临床诊断上具有重要的意义。 尿酸在 293nm 下有紫外特征吸收峰，利用 293nm 下尿酸酶催化尿酸前后吸光值的降低来计算 尿酸的含量。

自备实验用品及仪器: 恒温水浴锅、紫外可见分光光度计、1 mL 石英比色皿和蒸馏水。

操作步骤：

一、样本的制备

（1） 组织样品的制备：称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液进行冰浴匀浆。10000 rpm 4℃离心 10 分钟，取上清待测。

（2） 血清（浆）或尿液可直接测定。

二、测定操作表

1、 紫外分光光度计或者酶标仪预热 30min，调波长至 293nm，蒸馏水调零。

2、 试剂一 37℃预热 10min。

3、 向 1ml 石英比色皿中加入 500μL 的样本，再加入 500μL 的试剂一，立即测量 293nm 下的吸光度 A0，37℃保温，10min 再测定一次，记为 A1，计算 ΔA=A1-A0。

 三、UA 含量计算公式

（1） 按血清（浆）或尿液计算 UA 含量（μmol /mL 血清（浆）或尿液）=∆A÷（Ɛ×d）×V 反总÷V 样=∆A÷6.02

（2） 按样本鲜重计算 UA 含量（μg/g 鲜重）=∆A÷Ɛ÷d×V 反总÷（W ÷V 提×V 样）×M=27.9×∆A÷W

（3） 按样本蛋白浓度计算 UA 含量（μg/prot）=∆A÷Ɛ÷d×V 反总÷（Cpr×V 样）×M =27.9×∆A ÷Cpr

 Ɛ：尿酸的消光系数，12.04 mL/(μmol •cm)；d：比色皿光径，1cm；V 反总：反应总体积，1mL；

V 样：加入的样品体积，0.5mL；M：尿酸分子量 168；V 提：提取液体积，1mL；Cpr：样本蛋白 Solarbio 第 2 页，共 2 页 浓度，mg/mL。

注意事项：

1. 血清样本请在 24 小时内测定，或者 4℃密封避光保存不超过 72 小时。

2. 吸光值大于 1.5 可用蒸馏水稀释样本，并在计算公式中算入稀释倍数。