产品简介

X-Gal是β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)的显色底物，在β-半乳糖苷酶的催化下会产生蓝色产物。基于这个特点，当pUC系列载体DNA以lacZ 缺欠细胞作为宿主进行转化时，或M13噬菌体载体DNA进行转染时，如果在培养基中加入X-Gal和IPTG，由于β–半乳糖苷酶的α–互补性，可以根据是否呈现白色而方便地挑选择出基因重组体。

常用于β-半乳糖苷酶的原位染色检测以及蓝白斑筛选。

运输与保存方法

冰袋运输。-20 oC避光保存。

产品性质

注意事项

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作；

2）含有 X-Gal 的培养基 4℃避光保存，须在1周内使用。

配制储存液

称取200 mg X-Gal于15 mL 离心管，向其中加入10 mL DMF，旋涡震荡使其充分溶解后于-20℃避光保存，正确操作下，有效期可达5-12个月，如小量频繁使用，建议分装成1 mL/管后避光冻存。

蓝白斑筛选

1. X-Gal、IPTG 加入琼脂培养基溶液

1）高压灭菌已加琼脂的培养基，并冷却到50℃左右。

2）每毫升培养基内加入10 μL20 mg/mL X-gal 溶液、10 μL 0.1 M的IPTG（使其终浓度达到1 mM）；

3）加入适量抗生素；

4）混匀后按照平板大小倒入适量培养基，待培养基冷却至室温后，接种细菌于37℃过夜培养。

2. X-Gal、IPTG加到琼脂平板表面

1）于无菌超净工作台制备平板（如LB , 琼脂板）；

2）取40 μL 100 mM IPTG和120 μL 20 mg/mL X-gal混合，均匀地涂布于准备好的平板上；

【注】：平板边缘较难充分涂布均匀，容易产生假阳性，因此，为了得到更好结果，建议后续操作中尽可能在平板中间挑取单克隆。

3）37℃ 孵育直至所有液体被吸收（30 min或更长）。接种细菌于37℃过夜培养。

相关产品