McrBC限制性内切酶

中文名称：McrBC限制性内切酶
英文名称：
产品规格：2500U|500U
特性:
测定 CpG 二核苷酸的甲基化状态
测定胞嘧啶甲基化的 DNA
概述:
McrBC 是一种核酸内切酶，无论甲基胞嘧啶*是在 DNA 的一侧链上还是在对侧链上，McrBC都能切割。对未甲基化的DNA，Mc rBC 无作用。DNA 上 McrBC 的识别位点由两个 (G/A)mC 形式的半位点组成，这两个半位点之间的距离可以达到 3 kb，但是最佳距离为 55-103 bp。McrBC 的切割需要 GTP，当存在不可水解的 GTP 类似物时，该酶可以特异地结合到甲基化 DNA 上，但不能进行切割。McrBC 作用于一对 PumCG 序列元件,以此检测高比例甲基化的 CpGs，但是不能识别内部胞嘧啶甲基化了的 HpaII/MspI 位点（CCGG）。
* 5-甲基胞嘧啶、5-羟甲基胞嘧啶或者 N4-甲基胞嘧啶。
来源:
两种组成蛋白分别纯化自含有编码 McrB和 McrC 质粒的 E.coli K-12 菌株。
反应条件:
BalbBuffer 2 + BSA + GTP，37℃ 温育。热失活:65℃ 20 分钟。
随酶提供的试剂:
10X BalbBuffer 2
100X BSA
100X GTP (100 mM)
对照质粒 DNA
单位定义:
1 单位指在 50 μl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时切割含有多个 McrBC 位点的质粒所需要的酶量。
浓度:
10,000 units/ml。
注意事项:
McrBC 在每对半位点之间切割一次，切割位点靠近某一个半位点，但是通常距最近的甲基化碱基大约 30 bp。因此，当 DNA 中存在多个 McrBC 半位点时（例如胞嘧啶甲基化基因组DNA），识别序列的可变性导致位点重叠，产生弥散状而不是细窄的条带。 

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