快速一链cDNA合成试剂盒（用于PCR/qPCR）
产品名称： 快速一链cDNA合成试剂盒（用于PCR/qPCR）
英文名称： Fast 1st Strand cDNA Synthesis Kit (for PCR/qPCR)
产品编号： N132064
产品价格： null
产品产地： null
品牌商标： Arcegen
更新时间： 2025-05-21T10:40:22
使用范围： null
| 规格 | 价格 |
| 10 T | 200.0 |
| 100 T | 1200.0 |
- 联系人 : 钟珍
- 地址 : 申江南路4388号1幢2层208室
- 邮编 : 201314
- 所在区域 : 上海
- 电话 : 139****6764 点击查看
- 传真 : 点击查看
- 邮箱 : zhongz@magibagbio.com
- 二维码 : 点击查看
产品简介
本产品在经典的反转录试剂基础上，优化了反应时间，总反应时长最快可低于6分钟，且具有稳定的检出率、特异性、产量保证，适合具有复杂的RNA模板、少量模板以及低拷贝基因的反转录。
本产品反转录产物，可用于下游PCR或qPCR应用。试剂盒提供两种cDNA合成引物：Random Primers N6和Oligo (dT)18，用户可根据需要选择使用。
产品规格
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产品货号 |
N132064E |
N132064S |
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产品规格 |
10 T |
100 T |
产品组分
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组分编号 |
组分名称 |
N132064E |
N132064S |
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N132064-A |
4×Fast cDNA Synthesis Mix (No Dye) |
50 μL |
500 μL |
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N132064-B |
5×gDNA Digester Mix |
20 μL |
200 μL |
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N132064-C |
Random Primers（50 μM） |
20 μL |
200 μL |
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N132064-D |
Oligo d(T)18 Primers (50 μM) |
20 μL |
200 μL |
|
N132064-E |
RNase-free H2O |
200 μL |
2×1 mL |
产品储存
-25℃~ -15℃保存，有效期1年。
操作注意
1. 所有操作均应在冰上进行，且操作过程应避免 RNase 污染。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
3. 本产品仅作科研用途！
操作说明
一、含gDNA去除反转录步骤
1. gDNA消化
在RNase-free离心管中配制如下混合液，用移液器轻轻吹打混匀。42℃孵育2 min。
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组分 |
使用量 |
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5×gDNA Digester Mix |
2 μL |
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Total RNA or mRNA |
Total RNA：10 pg-5 μg mRNA：10 pg-500 ng |
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RNase-free H2O |
Up to 10 μL |
【注】：建议Total RNA的投入量不超过2 μg。如果目的基因表达丰度低，可增加投入量至最多5 μg。
2. 反转录体系配置
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组分 |
使用量 |
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上一步反应液 |
10 μL |
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4×Fast cDNA Synthesis Mix (No Dye) |
5 μL |
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Oligo d(T)18 Primers（50 μM) or Random Primers（50 μM） |
2 μL |
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RNase-free H2O |
Up to 20 μL |
【注】：1）引物投入量可根据模板投入量调整，若下游实验为qPCR，可在体系中按推荐量添加 Random Primers；2）建议先加入4×Fast cDNA Synthesis Mix (No Dye)混匀后再加入反转录引物，以保证引物不受gDNA Digester影响；3）体系配制完成后，请用移液器轻轻吹打混匀。
3. 反转录程序设置
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温度 |
时间 |
|
55℃ |
5 min |
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85℃ |
5 sec |
二、不含gDNA去除反转录步骤
1. 反转录体系配置
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组分 |
使用量 |
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4×Fast cDNA Synthesis Mix (No Dye) |
5 μL |
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Oligo d(T)18 Primers（50 μM) or Random Primers（50 μM） |
2 μL |
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Total RNA or mRNA |
Total RNA：10 pg-5 μg mRNA：10 pg-500 ng |
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RNase-free H2O |
Up to 20 μL |
2. 反转录程序设置
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温度 |
时间 |
|
55℃ |
5 min |
|
85℃ |
5 sec |
【注】：
1）建议Total RNA的投入量不超过2 μg。如果目的基因的表达丰度低，可增加投入量至最多5 μg。
2）引物投入量可根据模板投入量调整，若下游实验为qPCR，可在体系中按推荐量添加Random Primers；
3）对于高GC含量模板或者复杂模板，可将反转录温度提高到60℃。
4）本产品可合成14 kb以下的cDNA序列，如需得到更长的cDNA产物，可适当延长反转录时间。