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大鼠Bcl-2相关X蛋白(BAX)说明书

作者:上海联硕生物科技有限公司 2012-09-21T00:00 (访问量:4027)

                          

大鼠Bcl-2相关X蛋白(BAX)酶联免疫检测

          试剂盒使用说明书          AE91511Ra       

使用前仔细阅读本说明书酶联免疫试剂盒是基于双抗体夹心技术原理,来检测大鼠Bcl-2相关X蛋白(BAX),只能用于研究用途不得用于医学诊断。

    用于大鼠血清、尿液及相关液体样本中Bcl-2相关X蛋白(BAX)测定。

工作原理

本试剂盒采用的生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法ELISA)测定样品中大鼠Bcl-2相关X蛋白(BAX)水平。向预先包被了大鼠Bcl-2相关X蛋白(BAX)单克隆抗体的酶标孔中加入大鼠Bcl-2相关X蛋白(BAX),温育;温育后,加入生物素标记的抗Bcl-2相关X蛋白(BAX)。再与链霉亲和素-HRP结合,形成免疫复合物,再经过温育和洗涤,去除未结合的酶,然后加入底物A、B,产生蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅与样品中大鼠Bcl-2相关X蛋白(BAX)的浓度呈正相关。

试剂盒组成 

试剂盒组成

48孔配置

96孔配置

保存

说明书

1

1

封板膜

2片(48

2片(96

密封袋

1

1

酶标包被板

1×48

1×96

2-8℃保存

标准品:320 ng/L

0.5ml×1

0.5ml×1

2-8℃保存

标准品稀释液

3ml×1

6ml×1

2-8℃保存

链霉亲和素-HRP

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃保存

生物素标记的抗BAX抗体

0.5ml×1

1 ml×1

2-8℃保存

显色剂A

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃保存

显色剂B

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃保存

终止液

3ml×1

6ml×1

2-8℃保存

浓缩洗涤液

20ml×20倍)×1

20ml×30倍)×1

2-8℃保存

需要而未提供的试剂和器材

1. 37恒温箱。

2. 标准规格酶标仪。

3. 精密移液器及一次性吸头

4. 蒸馏水,

5. 一次性试管

6. 吸水纸

注意事项

1. 从2-8℃取出的试剂盒,在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差

3. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

4. 免交叉污染,要避免重复使用手中的吸头和封板膜

5. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

6. 底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。

洗板方法

手工洗板方法:甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将稀释后的洗涤液至少0.35ml注入孔内,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。

自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中

标本要求 

1.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

2.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但避免反复冻融

操作程序

1. 标准品的稀释:(本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。)

160 ng/L

5号标准品

120μl的原倍标准品加入120μl标准品稀释液

80 ng/L

4号标准品

120μl的5号标准品加入120μl标准品稀释液

40 ng

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