我们可供给您的昆虫宿主细胞系：
细胞 | 来源 | 用途 |
Sf9 | Sf9细胞系分离自IPLBSF21-AE | 适于转染、纯化、生产高滴度病毒、铺板以及表达重组蛋白 |
Sf21 | Sf21细胞衍生于IPLBSF-21细胞系 | 转染、纯化、生产高滴度病毒、铺板以及表达重组蛋白。Sf21细胞在一些结构表达方面优于Sf9细胞。 |
Hi5 | Hi5细胞系源于白菜尺蠖卵巢细胞，粉纹夜蛾细胞 | 适用于重组病毒颗粒表达，也常用于转染和空斑纯化，且Hi5细胞系更适合来表达分泌型重组蛋白 |
S2 | S2 是一种果蝇晚期胚胎细胞。其中多为雌性四倍体细胞，也有双倍体细胞 | 比较适合病毒结构蛋白等重组表达 |
主要服务步骤：
客户可提供具体的服务要求，或者由卡梅德生物全权制备重组蛋白
步骤 | 服务内容 | 时间 |
亚克隆 | *密码子优化，基因合成（无基因表达）；客户提供质粒：扩增并抽提含有目标基因的载体质粒 *拼接序列验证：测序 *交付：正确构建的重组表达质粒及测序原始报告 | 2周 |
病毒扩大化培养 | *重组bacmid DNA扩大化培养，并转染昆虫细胞制备P1和P2病毒stock * P2病毒滴度测定（滴度108－109），并验证小量蛋白表达 *P3病毒制备（可选，最多可制备3L重组杆状病毒） 交付：5-10 ml, >107 pfu/ml 病毒及实验报告 | 3–4周 |
表达优化及测试 | *P3病毒贮液转染昆虫细胞 - 不同的昆虫细胞系 - 不同的表达时间 - 不同的感染复数（MOI） *SDS-PAGE及WB分析 交付：图片，实验报告 | 1-2周 |
大规模重组蛋白表达及纯化 | * 1L (默认)，5L，10L，30L，80L，130L和250L任选 - 通过亲和，离子交换，疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。 *SDS-PAGE和WB验证蛋白表达 交付：重组蛋白1~5mg及纯化报告。可按客户要求提供含纯化标签（Tag）或切除纯化标签（Tag）的最终蛋白，纯度最高可达90%以上。 | 1–2周 |
我们的服务优势：
*密码子优化：包含稀有密码子分析，蛋白亲水性分析和跨膜结构域的预测分析
*多种融合标签载体和宿主，以保证高可溶蛋白表达和高蛋白活性
*多种规模蛋白发酵模式：小规模（500ml，2.5L，10L和30L）、大规模（80L,130L,250L和500L发酵罐）
*短时间内制备高纯度毫克级，克级重组蛋白
*低内毒素：LAL检测法<0.1EU/ug
*完整的GMP文件支撑体系，保证所有材料、试剂和制备信息可追溯