T4 RNA Ligase 2, truncated (T4 Rnl2, truncated或Rnl2 (1-249))，即T4 RNA连接酶2截短型，该酶仅包含T4 RNA连接酶2 N端249个氨基酸，可特异性地将5’端预腺苷酰化的DNA或RNA (App-DNA或App-RNA)连接到RNA的3’羟基。
T4 RNA Ligase 2, truncated与T4 RNA Ligase 2的酶活性完全不同，后者是一种ATP依赖的dsRNA ligase，而前者是一种不依赖于ATP的，依赖于5’端预腺苷酰化的单链核酸连接酶。
T4 RNA Ligase 2, truncated常用于microRNA (miRNA)等3’端为羟基的单链RNA在克隆、高通量测序建库或PCR检测等时，在3’羟基端添加5’端预腺苷酰化的DNA或RNA接头。
T4 RNA Ligase 2, truncated只能利用5’端预腺苷酰化的单链DNA或RNA作为3’端接头，因此可以大大降低连接反应的背景，通常是小RNA等建库时的优先选择。
T4 RNA Ligase 2, truncated连接时不需要ATP，但需要5’端预腺苷酰化(也称预腺苷化、腺苷酰化或腺苷化)底物。即使在有ATP存在的情况下，T4 RNA Ligase 2, truncated也不能催化连接单链DNA或RNA 5'-P末端与3'-OH末端之间形成磷酸二酯键。而T4 RNA Ligase 1可以在ATP存在的情况下，催化连接单链DNA或RNA 5'-P末端与3'-OH末端之间形成磷酸二酯键。因此T4 RNA Ligase 2, truncated特别适用于small RNA library的制备，不管是进行miRNA的测序还是进行directional mRNA-Seq，该酶都可以提高建库的质量，并有效降低连接反应的背景。
T4 RNA Ligase 2, truncated催化连接AppDNA和ssRNA的效果请参见图1。
图1. T4 RNA Ligase 2, truncated和N公司的同类产品(Competitor T4 RNA Ligase 2, truncated)催化连接AppDNA和ssRNA的效果图。使用本产品或国外N公司的T4 RNA Ligase 2, truncated，即T4 Rnl2(1-249)，在20µl反应体系中加入图中指定量的本产品或国外N公司的T4 Rnl2, truncated，25℃孵育60 min进行连接反应，反应完毕后立即取样在65℃孵育20 min终止反应，加入变性上样缓冲液，在95℃孵育5 min后放至冰浴中，随后用15%尿素(7M)变性聚丙烯酰胺凝胶进行电泳分析，最终进行核酸染色和荧光成像分析。如图所示，本产品与N公司的产品相比，具有类似的催化效果。
用途：5’末端预腺苷酰化的单链DNA或者RNA与单链RNA的3’羟基末端连接；cDNA文库构建中连接5’末端预腺苷酰化单链寡核苷酸和小RNA；链特异性的cDNA文库(strand-specific cDNA library)构建中连接5’末端预腺苷酰化单链寡核苷酸和RNA；二代测序中，miRNA文库构建中RNA的3’末端与接头之间的连接；cDNA文库的构建以进行小RNA转录组分析(small-RNA transcriptome analysis)。
来源：大肠杆菌表达的重组蛋白，表达基因为T4嗜菌体T4 RNA ligase 2 N端1-249位的氨基酸。
活性单位定义:200 units is defined as the amount of enzyme required to give 80% ligation of a 31-mer RNA to the pre-adenylated end of a 17-mer DNA (Universal miRNA Cloning Linker, Beyotime, Cat. No. R0702) in a total reaction volume of 10 µl in 1 hour at 25℃.
纯度：无DNA内切酶和外切酶活性，无RNA酶活性，无蛋白酶活性。
酶储存溶液：10 mM Tris-HCl (pH7.5), 100 mM NaCl, 0.1 mM EDTA, 0.1 mM DTT, 50% (v/v) Glycerol.
失活或抑制：65℃加热20 min可使T4 RNA Ligase 2, truncated失活，或加入蛋白酶K或EDTA也可以抑制其活性。
包装清单：
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| R0635S-1 | T4 RNA Ligase 2, truncated (200U/µl) | 25µl |
| R0635S-2 | 10X T4 Rnl2, truncated Buffer | 75µl |
| R0635S-3 | PEG8000 (50%, RNase free) | 400µl |
| — | 说明书 | 1份 |
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| R0635M-1 | T4 RNA Ligase 2, truncated (200U/µl) | 100µl |
| R0635M-2 | 10X T4 Rnl2, truncated Buffer | 300µl |
| R0635M-3 | PEG8000 (50%, RNase free) | 1.5ml |
| — | 说明书 | 1份 |
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| R0635L-1 | T4 RNA Ligase 2, truncated (200U/µl) | 500µl |
| R0635L-2 | 10X T4 Rnl2, truncated Buffer | 1.5ml |
| R0635L-3 | PEG8000 (50%, RNase free) | 7.5ml |
| — | 说明书 | 1份 |
保存条件：
-20℃保存，至少一年有效。
注意事项：
本产品提供的试剂均用不含DNA酶和RNA酶的水配制，可直接用于3’端为羟基的单链RNA和5’端腺苷酰化的DNA或RNA之间的连接反应。
可根据具体应用选择合适的操作方法，可能需准备额外的试剂，R0102 RNase inhibitor、R0022 DEPC水等。
使用本产品连接ssRNA和AppDNA时，建议使用的PEG8000的浓度为10%-30%，适当提高PEG8000的浓度，会显著提高T4 Rnl2, truncated的催化的连接效率，而不改变其反应特性。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明：
1.用于连接5’端腺苷酰化并且3’端不是羟基的(例如为氨基)单链DNA (AppDNA-NH2)和3’端为羟基的单链RNA (ssRNA)的使用说明具体如下。需要提前准备好待连接的样品，以及Universal miRNA Cloning Linker (R0702, Beyotime)或自备的适当接头。
2.参考下表在冰浴中配制如下反应体系：
| Reagent | Volume | Final Concentration |
| ssRNA | xµl | 0.5 or 1µM |
| DEPC-treated Water | (4-x-y)µl | - |
| Universal miRNA Cloning Linker (R0702, Beyotime) | yµl | 1 or 0.5, or 2 or 1µM |
| PEG8000 (50%, RNase Free) | 12µl | 0.3 |
| 10X T4 Rnl2, truncated Buffer | 2µl | 1 X |
| RNase Inhibitor (40U/μl) | 1µl | 2U/μl |
| T4 RNA Ligase2, truncated (200U/µl) | 1µl | 10U/µl |
| Total Volume | 20µl | - |
注意：
a.由于涉及RNA操作，需要严格按照RNA操作的规范进行，避免RNase污染，相关试剂和耗材需要经过DEPC处理去除RNase或者确保是RNase free的。推荐在连接体系中添加RNase Inhibitor，以避免ssRNA或其连接产物的降解，尽管经测试我们发现在严格操作的情况下，不加RNase Inhibitor也不会导致ssRNA或其连接产物发生明显降解。
b.进行连接反应时，如果样品RNA比较珍贵，希望充分被连接，可以按照接头和样品RNA的摩尔比为2:1的比例进行连接；如果样品RNA比较充裕，同时感觉接头的成本偏高时，可以按照接头和样品RNA的摩尔比摩尔比1:1甚至1:2的比例进行连接反应，这样可以很好地节省接头。ssRNA的用量可以根据实际的样品量进行适当调节，相应的接头的用量也按照比例进行适当调整即可。
c.如果同时进行多个连接反应，可以把上表中除ssRNA之外的所有溶液和酶提前预混合，然后再分装到各反应管内。
3.连接反应：25℃, 孵育60min。为了使连接反应更加充分，可以适当延长连接反应时间。
4. 终止反应：65℃，孵育20min。